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021-54845833/15800441009
基本信息
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
中文名稱 ：小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 ： LW n t-3A
細(xì)胞形態(tài) ： 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 ： 貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 ： 空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ： 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 ： DM EM (PM 150210)＋0.4m g/mlG 418(PB 180125)＋10%F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 ： 2~ 3分鐘
傳代比例（密度） ： 1:3-1:4
換液頻次 ： 2~ 3次/周
細(xì)胞背景描述
LW nt-3A 細(xì)胞是由L-M (T K -)細(xì)胞用W nt-3A 表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并在含G 418的培養(yǎng)基中篩選出的穩(wěn)轉(zhuǎn)株。W nt-3A 基因編碼一個(gè)有變異的信號(hào)功效分泌性糖蛋白，W nt基因控制胚胎發(fā)過(guò)程中的許多模式形成和生長(zhǎng)事件。L W nt-3A 細(xì)胞分泌有生物活性的W nt-3A 蛋白，L W nt-3A 細(xì)胞是目前生產(chǎn)W nt-3A 條件培養(yǎng)基的最好來(lái)源。由于這種條件培養(yǎng)基還包含W nt-3A 蛋白外的其他因子，對(duì)于涉及W nt-3A 條件培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)有必要用其來(lái)源細(xì)胞株作對(duì)照。
供體年齡 ： 雄性，100日齡
組織來(lái)源 ： 組織：皮下結(jié)締組織；疏松結(jié)締組織及脂肪；品系：C 3H /A n
細(xì)胞類型 ： 自發(fā)永生化細(xì)胞
生物安全等級(jí) ： 1
基因表達(dá) ： W n t-3A
細(xì)胞保藏中心 ： ATCC ; C R L-2647
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無(wú)漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5. 若觀察到異?；蛘邔?duì)細(xì)胞有疑問(wèn)，請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系；對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)?？筛覀兊募夹g(shù)支持交流。
